请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/01 06:49:19
![请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学](/uploads/image/z/3250165-13-5.jpg?t=%E8%AF%B7%E9%97%AE%E6%88%91%E6%8F%90%E5%8F%96%E8%9B%8B%E7%99%BD%2C%E6%B5%8B%E6%B5%93%E5%BA%A6%E6%98%AF2.0mg%2Fml%2C%E5%8F%AF%E6%98%AF%E5%81%9Asds-page%E7%94%B5%E6%B3%B3%E5%8D%B4%E7%9C%8B%E4%B8%8D%E5%88%B0%E6%9D%A1%E5%B8%A6%2C%E4%B8%8D%E7%9F%A5%E9%81%93%E5%8E%9F%E5%9B%A0%E6%98%AF%E4%BB%80%E4%B9%88%E6%88%91%E6%98%AF%E8%AE%A9%E5%90%8C%E5%AD%A6%E5%B8%AE%E6%88%91%E8%B7%91%E7%9A%84%E7%94%B5%E6%B3%B3%EF%BC%8C%E7%94%A8%E6%97%B62.5%E4%B8%AA%E5%B0%8F%E6%97%B6%EF%BC%8C%E6%88%91%E7%94%A8%E7%9A%84%E6%98%AF%E8%AF%95%E5%89%82%E7%9B%92%E5%AE%9A%E9%87%8F%E7%9A%84%EF%BC%8CBradford%E6%B3%95%E3%80%8B%EF%BC%8C%E7%94%A8%E7%9A%84%E6%B3%A2%E9%95%BF%E6%98%AF570nm%E3%80%82%E6%88%91%E5%90%8C%E5%AD%A6)
请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学
请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么
我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学的跑出条带来,我的却没有,补充一下,我的是菌体全蛋白》,他们说是我的样本浓度太高了,电泳不出来,请问是这种原因么????
请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学
可能有以下几个原因:
一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)
二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的
三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是共轭双键的吸收波长,很多物质都会有吸收,如果做亲和层析时咪唑也有吸收,RNA在280下也有吸收,可能你测得的是RNA?
最后,想问问你的蛋白质Marker有没有显示条带?
可能原因:
1. 上样太少。10ul就够了。注意变性时不要有太多沉淀,点样时要沉在点样孔底部。
2. 染色问题。marker正常吗?
3. 浓度测定不准。
有可能。浓度太高变性时会沉淀,进不去胶。不过2.0mg/ml也不算太高。加loading buffer后混匀,再加热。...
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可能原因:
1. 上样太少。10ul就够了。注意变性时不要有太多沉淀,点样时要沉在点样孔底部。
2. 染色问题。marker正常吗?
3. 浓度测定不准。
有可能。浓度太高变性时会沉淀,进不去胶。不过2.0mg/ml也不算太高。加loading buffer后混匀,再加热。
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是不是时间不够?
怎么测的浓度啊。。。