如果质粒dna双酶切电泳后,在胶上出现1)没有条带2)一条3)两条4)三条5)多条,都是什么原因?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/30 04:35:46
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如果质粒dna双酶切电泳后,在胶上出现1)没有条带2)一条3)两条4)三条5)多条,都是什么原因?
如果质粒dna双酶切电泳后,在胶上出现1)没有条带2)一条3)两条4)三条5)多条,都是什么原因?
如果质粒dna双酶切电泳后,在胶上出现1)没有条带2)一条3)两条4)三条5)多条,都是什么原因?
1) 质粒上没有这两种酶的酶切位点(或操作失误,试验失败)
2)质粒上只有一种酶的酶切位点或两个酶的位点非常接近(
结合上述答案提出自己的看法:1质粒上酶切位点太多导致质粒被降解为小片段,电泳时跑出去了或是太小难以从电泳图上显示出来。2质粒上只有一种酶的酶切位点或是其中一种或两种酶失活或两个酶的位点非常接近(<50bp),电泳看不出,但可以通过对照质粒做参考判断,对于上述的第一、三种情况应该比目的未酶切的条带大,因为单链的比环状的DNA电泳速度慢。
3正常情况下可以显现出大小不等的两条带,双酶切将整个环...
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结合上述答案提出自己的看法:1质粒上酶切位点太多导致质粒被降解为小片段,电泳时跑出去了或是太小难以从电泳图上显示出来。2质粒上只有一种酶的酶切位点或是其中一种或两种酶失活或两个酶的位点非常接近(<50bp),电泳看不出,但可以通过对照质粒做参考判断,对于上述的第一、三种情况应该比目的未酶切的条带大,因为单链的比环状的DNA电泳速度慢。
3正常情况下可以显现出大小不等的两条带,双酶切将整个环状DNA切成两个片段。4可能其中一个酶质粒上有2个酶切位点,或是因为酶切不彻底,部分质粒没有被双酶切(大片段,小片段,和单酶切得出的片段,因片段大小不一呈现出三条带)。
5质粒上有多个关于这两个酶的酶切位点,即酶切不专一,从而酶切出大小不等的多个片段,或是酶的专一性不强,酶切时间有点过长,可以适时减少酶切时间,或换用专一性跟强的酶。
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