PCR为什么要在冰上操作?做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/27 13:22:42
![PCR为什么要在冰上操作?做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.](/uploads/image/z/13845378-66-8.jpg?t=PCR%E4%B8%BA%E4%BB%80%E4%B9%88%E8%A6%81%E5%9C%A8%E5%86%B0%E4%B8%8A%E6%93%8D%E4%BD%9C%3F%E5%81%9APCR%E7%9A%84%E6%97%B6%E5%80%99%2C%E5%A6%82%E5%8A%A0%E5%90%84%E4%B8%AA%E5%8F%8D%E5%BA%94%E6%B6%B2Taq%E9%85%B6%2C%E5%BC%95%E7%89%A9%2CdNTP%2C%E6%A8%A1%E6%9D%BF%2CPCR+buffer%E7%AD%89%E8%A6%81%E5%9C%A8%E5%86%B0%28%E5%86%B0%E7%9B%92%29%E4%B8%8A%E6%93%8D%E4%BD%9C%3F%E5%88%9D%E6%AC%A1%E6%93%8D%E4%BD%9C%2C%E6%95%AC%E8%AF%B7%E7%AD%94%E5%A4%8D.)
PCR为什么要在冰上操作?做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.
PCR为什么要在冰上操作?
做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.
PCR为什么要在冰上操作?做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.
这些个材料都容易变质,taq要失活,引物会降解,模板会断裂……所以要保持低温,而且用完要马上放回-20℃冰箱保存.
taq酶是耐高温的DNA聚合酶~
酶活在低温时几乎不显现但不至失活~放到PCR仪里时又能继续表现高活力
在冰盒上操作是防止反应底物提前在室温下发生反应~
操作时还有注意,尽量不用手去接触小管底部,而是轻拿靠近管口处,因为手上的温度可是够高的哟~...
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taq酶是耐高温的DNA聚合酶~
酶活在低温时几乎不显现但不至失活~放到PCR仪里时又能继续表现高活力
在冰盒上操作是防止反应底物提前在室温下发生反应~
操作时还有注意,尽量不用手去接触小管底部,而是轻拿靠近管口处,因为手上的温度可是够高的哟~
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因为这些都很容易失活的,还有要注意引物和dNTP不要反复冻融,也容易失活的
保证酶活,核酸物质稳定.
以上说的不够全面。
这个叫冷启动,第一怕TAQ酶降低活性,第二为更好的首轮解链,提高最终的特异性。
tritton的穿透力太强,温度底的时候可以防止质粒污染过度。
tap酶在低温时降低反应和代谢,延长时间。促使反应稳步不燥的进行。
在冰上可以保持各种酶及底物不失活,同时也使得酶的活性很低
对于PCR的taq酶以及分子生物学中很多酶而言,在室温下是有活性的,若在室温下操作,你在东西未加好之前就已经有副反应进行了,这不利于实验
实际上,很多时候也没这么严格,PCR如果样品不多,完全可以在室温下操作...
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在冰上可以保持各种酶及底物不失活,同时也使得酶的活性很低
对于PCR的taq酶以及分子生物学中很多酶而言,在室温下是有活性的,若在室温下操作,你在东西未加好之前就已经有副反应进行了,这不利于实验
实际上,很多时候也没这么严格,PCR如果样品不多,完全可以在室温下操作
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