设计pcr体系质粒扩增扩增片段1.8kb两引物都是87碱基pfu酶怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度我的引物gc含量大约为0.6 因为是设计的同源臂 所以比较长
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/29 22:50:30
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设计pcr体系质粒扩增扩增片段1.8kb两引物都是87碱基pfu酶怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度我的引物gc含量大约为0.6 因为是设计的同源臂 所以比较长
设计pcr体系
质粒扩增
扩增片段1.8kb
两引物都是87碱基
pfu酶
怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度
我的引物gc含量大约为0.6
因为是设计的同源臂 所以比较长
设计pcr体系质粒扩增扩增片段1.8kb两引物都是87碱基pfu酶怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度我的引物gc含量大约为0.6 因为是设计的同源臂 所以比较长
你的引物怎么这么长?
预变性94℃ 5min,变性45s,退火温度看你引物是怎么设计的了.你这么长的引物估计退火温度肯定是60℃以上了.退火45s即可.72℃延伸1.5min到2min.(pfu聚合速度大约2KB/min)
变性 退火 延伸的温度一般为94--95 。 45--65 。 72。
具体的还需根据你那引物来
pfu酶最佳延伸温度是68度,所以建议你这样:
1,94度预变性3分钟
2,94度,1分钟-->68度2分钟。循环40次
3,68延伸5分钟
由于你的GC含量较高,最好在PCR体系中加入2%的DMSO
设计pcr体系质粒扩增扩增片段1.8kb两引物都是87碱基pfu酶怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度我的引物gc含量大约为0.6 因为是设计的同源臂 所以比较长
什么是lamda DNA?和质粒DNA有什么区别?pcr的聚合酶说可以扩增8kb的lamda DNA,没说质粒DNA.那我要pcr质粒的一个片段可以扩增多大的片段?
设计一个典型的PCR扩增程序和PCR反应体系.
重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一PCR扩增出1kb的带,双酶切(3h)切出的是2kb的带,和载体相比,切出的带不亮,有的根本看不清,可能是目的片段不浓,如果是质粒不纯,我是从单菌落来
RT-PCR时,扩增片段长度多态性
设计性实验:PCR基因扩增(在线等……)已知PaDREB基因长为600bp左右,请通过PCR扩增获得DNA片段. 要求从引物设计,PCR反应体系和反应程序方面设计该实验.片段如下:ATGGATTATTCGCAGTACGG…………CGTCCTTGTGG
设计性实验:PCR基因扩增(在线等)已知PaDREB基因长为600bp左右,请通过PCR扩增获得DNA片段.要求从引物设计,PCR反应体系和反应程序方面设计该实验.片段如下:ATGGATTATTCGCAGTACGG…………CGTCCTTGTGGAACGATTA
pcr扩增中,如何设计引物?
长pcr引物设计以及扩增条件我有个环状的大概35kb的基因组需要全部扩增.我想分几段来扩增,每段大概5000-8000bp左右吧.本人有takara公司的la-taq体系,需要怎样设计引物啊?有哪些原则,有这方面的
PCR在扩增长片段的设计引物时需要注意什么?
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PCR扩增时,25微升体系一般加引物多少?
请问PCR扩增体系中的ddH2O(重蒸水)有何用?
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PCR过程中为什么要扩增DNA片段
为什么PCR能将特定的DNA片段扩增?
PCR仪一般每分钟扩增多长的片段